带his标签的蛋白,表达后68ku,包涵体,8m尿素不容,几M才容呀,8m里面加了10mm浓度的咪唑,用盐酸胍还没有试过

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/15 19:40:26
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一般做包涵体复性,所用的变性剂是8M尿素和6M盐酸胍,是两个一起用的.只用一个有时候效果确实不怎么好.而且啊,在变性剂中,也是有部分蛋白不会溶的,所以多少都会有沉淀的.做包涵体复性很麻烦,我建议你试试通过调节诱导条件,增加可溶性表达的比例好些.一般像PET系统降低诱导温度可以显著提高可溶性表达的比例.

带his标签的蛋白,表达后68ku,包涵体,8m尿素不容,几M才容呀,8m里面加了10mm浓度的咪唑,用盐酸胍还没有试过 求助蛋白表达中的his标签的作用 为什么用带HIS标签的镍柱纯化试剂盒纯化蛋白后包ELISA可以避免大肠杆菌的干扰 6*his标签作用在基因工程中,重组蛋白通才以融合蛋白的形式表达,其中常用一种6*his标签.目的是什么?极其原理? 表达细菌自身的蛋白会形成包涵体吗 his标签蛋白是什么 表达纯化蛋白过程中出现一条条带略小的非目的蛋白,且同样带有组氨酸标签,疑似转录时断裂造成的,如何能纯化出高纯度的目的蛋白,带组氨酸标签的 His,myc,eGFP,flag,HA蛋白标签的基因序列 100ku的碱性蛋白家族 ku是啥意思 包涵体怎样产生的,怎样提高大肠杆菌中外源蛋白可溶性表达 基因带六个his标签,蛋白纯化时为何挂不上镍柱求解 包涵体蛋白超声裂解后,通过离心能将细胞碎片去除吗,怎样的方法能得到比较纯的包涵体可以进行称量计算 重组蛋白的检测通过SDS-PAGE中重组蛋白在蛋白MARKER的位置判断蛋白的表达情况 和 通过用标签抗体检测重组蛋白判断蛋白表达情况,这样两种方式哪种更好?为什么? ku蛋白是什么 蛋白析出问题我的是HIS标签蛋白,超声裂解菌体后12000离心,SDS-PAGE检测目的蛋白大量存在于上清,于是按可溶性蛋白镍柱纯化,纯化出以后室温放置一段时间或是放于-20拿出后蛋白析出,而且一直 大肠杆菌自身蛋白在其细胞内过表达会否产生包涵体呢?尤其是膜定位蛋白?包涵体是异源表达的结果,那么如果在大肠杆菌中过表达自身膜蛋白,会不会因为膜空间不足而导致包涵体产生? 融合蛋白 His标签问题我的目的基因片段在pET28a载体中是这样的一个情况 -----CATCATCATCATCATCAC(His-tag)-------14bp-------ATG(后面是我的目的基因片段)-------这样的话表达的蛋白会有His-tag吗? 有关GST-pull down和双向电泳问题第一次做实验,请问试验组加入带pull down蛋白的GST标签后,当加入克隆好的蛋白后,首先洗脱掉的仅仅是非特异性蛋白还是连同GST以及PULL DOWN蛋白一起洗脱掉了?双