我用PCR测序方法找到一些SNP,现在想用荧光定量RT-PCR的溶解曲线法进行验证,请问各位大师如何操作呢?我知道用探针法是最好的,但是设计探针花费太高,老板不愿意,所以想用溶解曲线法,如有哪

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/08 11:40:48
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我用PCR测序方法找到一些SNP,现在想用荧光定量RT-PCR的溶解曲线法进行验证,请问各位大师如何操作呢?
我知道用探针法是最好的,但是设计探针花费太高,老板不愿意,所以想用溶解曲线法,如有哪位高手做过或懂的,请赐教,不胜感激.

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可以先将SNP位点附近的区域用PCR扩增出来,再在这个上设计引物,直接P或者克隆到质粒上在P.
俺也就建议一下哈,你可以讲SNP位点设计在引物的3'端附近,然后计算扩增效率.估计看溶解曲线比较难看出来.

我用PCR测序方法找到一些SNP,现在想用荧光定量RT-PCR的溶解曲线法进行验证,请问各位大师如何操作呢?我知道用探针法是最好的,但是设计探针花费太高,老板不愿意,所以想用溶解曲线法,如有哪 实时定量PCR能检测snp吗? PCR产物酶切的问题我做的是PCR-RFLP法分析SNP:引物是参照文献设计,takara合成的.订购的是takara的Taq酶.PCR 条件也是文献中的,1%琼脂糖电泳显示PCR产物大小为290bp.用文献报道的Msp I文字1μL,PCR产物 PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激. 我现在需要进行全基因组扫描筛选SNP位点,使用的是混合DNA,如何纯化混合DNA?我是送到测序公司做的,他们要我送纯化好的样品,我现在有DNA样品, 我现在有了一个基因的cDNA序列,现在想找到这个基因的内含子序列,怎么办?听说有一种方法是找相近物种该基因的全序列,然后做比对然后找到内含子位置,再设计引物将内含子区域测序?有没有 直接测序检测SNP与疾病的相关性,到底该用多少多少样本啊?请有经验的高手指教或者推荐一些关于直接测序的文献,可惜我已经不能送分给您了!我想可能我之前的表示不是很全面,是这样的 测序法检测SNP,结果一个突变都没有?什么原因?测序法检测SNP,PCR了一段序列,包含一个外显子区及其两端相邻的内含子的几十个bp,Pubmed上该外显子区有4个突变,其中MAF最大的为29.5%,但测序结果回 PCR产物用什么方法纯化我要做RFLP,PCR后要做酶切,请问用什么方法纯化PCR产物比较好呢? 我现在也在做全基因组的SNP,但是是个新手, 如何给一段序列增加一个酶切位点.做SNP的,酶切的方法简单快捷,但是选择基因的位点没有酶切位点,想请问大家如何给一段序列增加一个酶切位点?具体的实验步骤和所用仪器设备.PCR的过程就 是做基因克隆还是pcr产物直接测序?我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf RT-PCR用什么方法做统计 PCR产物测序 请问用Taqman探针做RT-PCR用的实时定量PCR仪是什么型号的呢?现在我们要做RT-PCR(逆转录+荧光定量PCR),探针打算用taqman,我想问一下用的PCR是什么型号的呢?在网上查了一下,看到的主要都是一些T 目的片段转入表达载体后,用什么方法检测?有没有除了测序,酶切,PCR,探针检测以外的方法?最好详细点. 我现在分离出一些真菌,想做鉴定,流程是怎样呢?我查了下文献,是不是先提取DNA,再PCR,然后电泳,最后对比条带?微生物不是我们的常规实验,有没有比较简便的步骤?象提DNA和PCR这两步是不是有简 测序结果出来后如何进行SNP分析,需要用到哪些软件?