TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 10:39:12
TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载

TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载
TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)
TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载么,但是和载体序列比对同源性也不高啊,那测出来的序列是什么?
注:目的片段PCR扩增我用的是简并引物,片段长1200bp左右,切胶回收后做的连接转化,拿给测序公司的检测引物是载体上的M13通用引物.
载体是PMD19-T,菌液PCR验证条带是1000多bp我才拿去测序的,验证引物是M13通用引物.
马上回家过年,这周做不完,年都过不好aaaaa

TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载
poly结构可以尝试测序下去,应该没有太大问题,至于你说的引物问题,将已知的载体序列去掉开始那部分就应该是你的引物序列,因为是简并引物,所以只会出现一种引物情况,或者是你
PCR的时候,上下游的简并引物之间是不是特异性不好,所以出现不是你需要的扩增产物,你挑选的单克隆只是其中的一种,或者你挑选另外的单克隆试试

TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到)TA克隆正反向测序结果都找不到扩增目的条带的引物(载体通用引物也找不到,互补序列都试了),请问这是空载 克隆测序结果找不到目的片段的引物序列 TA克隆后如何分析测序结果? 有没有人反向PCR以后,连到载体上,测序发现:只有引物正确,其它的都不是目的序列就是说反向PCR后,扩增出来的序列本应该是有酶切位点的,结果测序结果显示没有那个酶切位点,但是却有引物 有没有人反向PCR以后,连到载体上,测序发现:只有引物正确,其它的都不是目的序列就是说反向PCR后,扩增出来的序列本应该是有酶切位点的,结果测序结果显示没有那个酶切位点,但是却有引物 胶回收纯化后克隆测序找不到我所用的引物是怎么回事啊我是用10bpRAPD随机引物和模板扩增得到的特异性条带回收纯化,再克隆测序的,可是拿到的测序结果为什么找不到我随机引物序列呢?是 检测血清的病毒为阴性,PCR确能扩增出目的条带,测序结果也对,是怎么回事? 测序结果如何知道是不是自己想要的目的片段,如何比较!做克隆的. 转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带要大,对PCR扩增产物测序,结果与原序列比对同源性为60%,说明转基因植物PCR检测,扩增条带比预期目的条带大得多,对pCR扩增产物测序,返回结果为重复 PCR扩增后除目的带外还有几条杂带,只切目的带能连上克隆载体吗? 克隆未知基因DNA为两条链,那么测序的结果可能是编码蛋白质的那条链的核酸顺序,也能是不编码的那条.如果测得是不编码的那条我是不是应该用软件来进行反向互补再得到我想要的正确序列 能不能用PCR直接扩增目的片段,然后转入表达载体,代替在克隆载体或dh5a中的扩增 请问您一个基因的全长已经克隆出来,怎样进行验证呢?从ATG和TGA设引物重新扩增,还是从非编区设引物呢我已经从ATG和TGA设引物了,挑了四五个单克隆,可是每个测序结果都有几个碱基突变, 亚克隆测序结果说明什么 PCR扩增后的目的基因如何提取分离?对阳性克隆中的目的基因又如何提取分离? 转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同,通用引物和自身引物开始都能得 PCR扩增为什么要用正反向两个引物!而PCR测序反应只需一个引物呢? TA克隆时,如何选择T载体?在三博克隆测序,PCR产物长度只有85bp,选择什么样的T载体比较好呢?