荧光定量PCR技术中的扩增效率什么意思

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/01 18:18:14
荧光定量PCR技术中的扩增效率什么意思

荧光定量PCR技术中的扩增效率什么意思
荧光定量PCR技术中的扩增效率什么意思

荧光定量PCR技术中的扩增效率什么意思
PCR原理中,反应一个循环,PCR产物扩增一倍,即为之前的2倍.……反应N个循环,理论上应为原来的2的N次方.此时,理论的扩增效率是100%,即1.
但实际上,由于酶,dNTPs,引物,模板等因素,扩增效率达不到100%.
因此,我们就要做标准曲线,看实际的扩增效率是多少,也就是标准曲线的斜率.理论上100%的扩增效率,换算出来的斜率是-3.32.

PCR扩增为指数扩增,每一扩增周期后产物的量可以下式表达:
Yn=Yn-1·(1+E) = Yn-2·(1+E)2=…= X·(1+E)n
0≤E≤1
其中E表示扩增效率,Yn表示在n个周期后PCR产物的分子数量,Yn-1为n-1个周期后PCR产物的分子数量。
...

全部展开

PCR扩增为指数扩增,每一扩增周期后产物的量可以下式表达:
Yn=Yn-1·(1+E) = Yn-2·(1+E)2=…= X·(1+E)n
0≤E≤1
其中E表示扩增效率,Yn表示在n个周期后PCR产物的分子数量,Yn-1为n-1个周期后PCR产物的分子数量。
等式仅在限定的扩增周期数(通常为20或30)内成立。超过此周期数,扩增过程即由指数扩增降低至稳定的扩增速率,最终达到平台,不再扩增.

收起