作业帮基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/13 06:54:47
基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的
基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始
什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的
基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的
克隆基因的编码框时,必须从ATG开始或UTR处开始.当你想表达这个基因时,PCR产物必须包括完整的读码框；当你需要该基因融合GFP时,不仅需要从ATG开始,终止密码子必须突变掉,而且目的基因与GFP必须在一个读码框中.
而需要监测目的基因的表达水平时,如果使用RT-PCR,则最好是从基因的中上段开始设计引物,因为在RNA提取时,可能得到的部分RNA有小部分降解,或反转录时,只反转录了一部分,没有到ATG这端,因此,从中上有设计的引物更容易监测到目的基因的表达.
很多情况下载体是带有ATG和TAA的，自己序列里的信号肽不会影响表达后的功能！
因为如果是融合表达的载体，有起始密码子的，不需要ATG起始，而设计者认为前面一段对目的蛋白的功能不受影响，因此也就可以去除。您好!很感谢您的回答.我很同意一楼的说法"当你想表达这个基因时，PCR产物必须包括完整的读码框",之前我也是这种观念,因此对于做基因的克隆表达时,引物不是从目的基因的ATG开始的即PCR产物没有包括完整的读码框的很是疑惑不解,今天看到你的回答"设计者认为前面一段对目的蛋白的功...
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因为如果是融合表达的载体，有起始密码子的，不需要ATG起始，而设计者认为前面一段对目的蛋白的功能不受影响，因此也就可以去除。
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目的基因的表达必须从ATG开始，检测目的基因是否有表达的情况下，可以中间设计引物